? ? ??會上，甘肅省領軍人才、慶陽市人民醫院主任檢驗師侯娟娟主任為我們分享了【百日咳: 被忽略下的悄然復現】主題。

百日咳是由百日咳鮑特桿菌引起的急性呼吸道傳染病，主要通過飛沫傳播，傳染性強。最新的臨床癥狀為慢性咳嗽，如未得到及時有效治療，病程可達數個月。且有較嚴重的并發癥，如肺炎、百日咳腦病、心血管系統障礙、營養不良等。“百日咳再現”在我國已經出現，在百日咳疫情高發的同時其流行病學特征發生改變，高危人群和傳播模式已經與傳統百日咳相差甚遠。

百日咳再現及危害

? ? ? 根據國家衛生計生委疾病預防控制局公布的疫情報告顯示，2014-2018年，我國百日咳發病率逐年升高，在新生兒廣泛常規接種百白破疫苗的情況下，發病率依然從2014年的0.5/105暴漲到2018年的1.6/105。此外我國百日咳還呈現年長兒和成人的發病率上升，成為主要傳染源、出現局部地區爆發、出現新臨床特征等情況，2005-2014年天津診斷百日咳病例882例，其中成年人252例，占發病人數的28.57%。2005-2008年無成年人病例的報告；2009年為5.26%；隨后逐年增加，到2013年發病率達到最高的44.09%。后五年成年人發病構成比前五年上升了26倍。發病人群年齡分布中，21-30年齡段占比最高，為36.12%。

*中國2011_2017年百日咳流行病學特征分析. 中國疫苗和免疫. 2018

? ? ??我國正面臨著“百日咳再現”問題的嚴峻考驗，近年來國內一些省份也陸續出現百日咳疫情大幅上升，引起各方高度關注，百日咳現已經成為臨床醫師廣泛關注的傳染性疾病。百日咳鮑特桿菌引起的早期呼吸道感染癥狀在臨床表現方面與其他呼吸道病原體引起的呼吸道疾病較為類似，因此需要有效的診斷方法能快速地鑒定百日咳鮑特桿菌，有助于流行病學現場處置。

? ? ??目前臨床上常用細菌培養和血清學篩查等方法對百日咳桿菌進行檢測，但百日咳桿菌分離培養難度大，培養周期長，而血清學篩查存在靈敏性低，特異性不高的缺陷，限制了上述兩種百日咳桿菌檢測方法在臨床上的應用。

本項目通過核酸檢測的方法快速地鑒定樣本中的百日咳鮑特桿菌，是《中國兒童百日咳診斷及治療建議》中推薦的百日咳桿菌的有效診斷方法，有助于實現精準診斷，為后續的藥物治療提供診斷依據指導精準用藥，并且有利于流行病學的處置。

《中國兒童百日咳診斷及治療建議》中指出的百日咳的臨床診斷標準和實驗室診斷標準：

IS481引物

無法特異性檢測百日咳

億立方應用生物信息學方法

設計出特異針對百日咳的引物

? ? ??①應用生物信息學方法服務器計算，對比NCBI數據庫中所有2萬多條百日咳序列設計引物探針，100%匹配能檢出。傳統引物設計選擇有限的代表序列，包容性和特異性不足。

? ? ??②所選擇的檢測靶標為高拷貝數靶標（其在百日咳基因組中的拷貝數為15-18個），提高了檢測的靈敏度，最低檢測限達到200 copies/mL。

百日咳核酸檢測的必要性

? ? ??百日咳是一種可以治愈的疾病,患者的預后通常較好。然而,準確的病情診斷是控制百日咳傳播的關鍵,特別是疾病早期的判斷。百日咳的實驗室檢測易受標本采集、采樣時間、疫苗接種史和抗生素使用等因素的影響,百日咳桿菌難以培養且培養周期較長,血清學檢測的靈敏度和特異性也不高。相比之下,聚合酶鏈式反應(PCR)技術作為診斷百日咳感染的敏感方法,可以實現疾病的及早發現、診斷和治療,顯著提高患者的生活質量。

? ? ??深圳市億立方生物技術有限公司的百日咳桿菌核酸檢測試劑盒具有更高的靈敏性，理論上能檢測出一個拷貝的病原體，更適合于早期病程患兒病情診斷；針對百日咳特異性序列設計引物探針，與血清學檢驗所用的抗原片段相比，具有更高的特異性，能提高檢測的特異性；可擴大檢測人群范圍，對免疫缺陷者的檢測成為可能。血清學篩查存在靈敏性低，特異性不高的缺陷，百日咳桿菌核酸檢測更適用于臨床大規模篩查。

? ? ??該產品適用于檢測人口咽拭子或鼻咽拭子樣本中的百日咳桿菌DNA，是全國首個獲批第三類醫療器械注冊證的產品，目前已廣泛應用于全國各大醫院。

? ? ??采用臨床廣為接受并且穩定實時熒光PCR技術，以百日咳桿菌基因組DNA高度保守區為靶區域進行基因檢測，反應體系靈活多變，檢測不受樣本數量的限制，可同時完成多個樣本檢測，操作簡單，檢測試劑中包含核酸提取試劑，核酸提取后進行PCR反應，PCR反應體系中含有dU-UNG酶防污染體系和陰陽質控品，以避免假陽性和假陰性結果。

百日咳多中心

? ? ??我國人口基數大，百日咳實際發病數遠高于報告數，且公共衛生意識不足，成人感染不重視且沒有成人疫苗，為進一步完善、規范、和解決百日咳患者臨床實驗室診斷中的難點問題，提高醫療保健機構百日咳診療能力，保障人民生命健康，根據中國婦幼保健院協會《關于發布“百日咳桿菌核酸檢測在婦兒領域應用的多中心研究”項目研究方案的通知》（中婦幼便函[2021]281號）文件要求。

? ? ??億立方將不斷憑借自身的優勢，繼續做敢于開拓創新、有責任擔當的高新技術企業，為落實健康中國建設添磚加瓦。

? ? ??億立方人定會不負期待，繼續以自我創新為核心推動力，努力進取，力爭做分子診斷先進技術的領軍企業。